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改善記憶作用檢驗(yàn)方法

日期:2025-10-04 22:58
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摘要:

1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
1.1跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)
1.1.1原理
反應(yīng)箱底鋪有通36v電的銅柵,動(dòng)物受到電擊,其正常反應(yīng)是跳上箱內(nèi)絕緣的平臺(tái)以避免傷害性刺激。多數(shù)動(dòng)物可能再次或多次跳至銅柵上,受到電擊又迅速跳回平臺(tái),如此訓(xùn)練5min,并記錄每鼠受到電擊的次數(shù)或叫錯(cuò)誤次數(shù),以此作為學(xué)習(xí)成績。24h或48h重作測驗(yàn),此即記憶保持測驗(yàn)。記錄受電擊的動(dòng)物數(shù)、**次跳下平臺(tái)的潛伏期和3min內(nèi)的錯(cuò)誤總數(shù)。停止訓(xùn)練5天后(也可以在訓(xùn)練后的一周、兩周或其它時(shí)間點(diǎn))進(jìn)行記憶消退實(shí)驗(yàn)。
1.1.2儀器與試劑
跳臺(tái)儀:該裝置為10×10×60cm3的被動(dòng)回避條件反射箱,用黑色塑料板分隔成5間。底面鋪以銅柵,間距為0.5cm,可以通電,電壓強(qiáng)度由一變壓器控制。每間左后角置一高和直徑均為4.5cm的絕緣平臺(tái)。
試劑:樟柳堿、環(huán)已酰亞胺、乙醇。
1.1.3實(shí)驗(yàn)方法
1.1.3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 斷乳鼠,體重10g左右;或成年鼠,體重18-22g用于改善老年人記憶的產(chǎn)品必須采用成年鼠。雌雄均可,單一性別不少于10只(*后有效數(shù)據(jù))。推薦使用近交系小鼠。
1.1.3.2劑量設(shè)計(jì)和分組
共設(shè)高、中、低、對(duì)照四個(gè)組,根據(jù)推薦的人體每日每公斤體重?cái)z入量,擴(kuò)大10倍作為其中一個(gè)劑量組,根據(jù)受試樣品的具體情況另設(shè)兩個(gè)劑量組。經(jīng)口給樣。原則上連續(xù)給樣30天,也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要自行設(shè)定給樣期限。
1.1.3.3實(shí)驗(yàn)方法及步驟
1.1.3.3.1受試樣品對(duì)正常小鼠記憶的影響
末次給樣后次日(或一次給樣后1h)開始訓(xùn)練。將動(dòng)物放入反應(yīng)箱內(nèi)(臺(tái)上、臺(tái)下)適應(yīng)環(huán)境3min,然后將動(dòng)物放置反應(yīng)箱內(nèi)的銅柵上,立即通以36v的交流電。動(dòng)物受到電擊,其正常反應(yīng)是跳回平臺(tái)(絕緣體),以躲避傷害性刺激。多數(shù)動(dòng)物可能再次或多次跳至銅柵上,受到電擊又迅速跳回平臺(tái)上。訓(xùn)練一次后,將動(dòng)物放在反應(yīng)箱內(nèi)的平臺(tái)上,記錄5min內(nèi)各鼠跳下平臺(tái)的錯(cuò)誤次數(shù)和**次跳下平臺(tái)的潛伏期,以此作為學(xué)習(xí)成績(記憶獲得)。24或48h后進(jìn)行重測驗(yàn),將小鼠放在平臺(tái)上,記錄各鼠**次跳下平臺(tái)的潛伏期、各鼠3min內(nèi)電擊次數(shù)和受電擊的動(dòng)物數(shù)總數(shù),同時(shí)計(jì)算出現(xiàn)錯(cuò)誤反應(yīng)的動(dòng)物的百分率(受電擊的動(dòng)物數(shù)占該組動(dòng)物總數(shù)的百分率)(記憶鞏固)。停止訓(xùn)練5天后(包括第5天)可以在不同的時(shí)間進(jìn)行一次或多次記憶消退實(shí)驗(yàn)(記憶再現(xiàn),方法同重測驗(yàn))。
1.1.3.3.2受試樣品對(duì)記憶障礙模型小鼠的影響
1.1.3.3.2.1模型制造
記憶獲得障礙模型制造:訓(xùn)練前10min腹腔注射樟柳堿或東莨菪堿5mg/kg體重;
記憶鞏固障礙模型制造:訓(xùn)練前10min腹腔注射環(huán)已酰亞胺120mg/kg體重;
記憶再現(xiàn)障礙模型制造:重測驗(yàn)前30min灌胃30%的乙醇0.1mL/10g體重;
1.1.3.3.2.2記憶測試的操作方法:同1.1.3.3.1
1.1.4數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定
潛伏期結(jié)果為計(jì)量資料,可用方差分析,但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),方差齊,計(jì)算F值,F(xiàn)值 錯(cuò)誤次數(shù)和3min內(nèi)跳下平臺(tái)的動(dòng)物均為記數(shù)資料,可用X2檢驗(yàn),四格表總例數(shù)小于40,或總例數(shù)等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí),應(yīng)改用確切概率法。
若受試樣品組與對(duì)照組比較,潛伏期明顯延長,錯(cuò)誤次數(shù)或跳下平臺(tái)的動(dòng)物明顯少于對(duì)照組,差異有顯著性,以上三項(xiàng)指標(biāo)中,任一階段(記憶獲得、記憶鞏固和記憶再現(xiàn))的任一項(xiàng)指標(biāo)陽性,均可判定該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性。
1.1.5注意事項(xiàng)
1.1.5.1動(dòng)物在24h內(nèi)有其活動(dòng)周期,不同時(shí)相處于不同的覺醒水平,故每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)選擇同一時(shí)間(上午8-12點(diǎn)或下午1-4點(diǎn)),前后2天的實(shí)驗(yàn)要在同一時(shí)間內(nèi)完成。
1.1.5.2實(shí)驗(yàn)應(yīng)在隔音,光強(qiáng)度和溫、濕度適宜且保持一致的行為實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。
1.1.5.3推薦使用純系動(dòng)物,實(shí)驗(yàn)前數(shù)天將動(dòng)物移至實(shí)驗(yàn)室以適應(yīng)周圍環(huán)境。
1.1.5.4實(shí)驗(yàn)者必須每天與動(dòng)物接觸,如:喂水、喂食和撫摸動(dòng)物。
1.1.5.5減少非特異性干擾,如情緒、注意、動(dòng)機(jī)、覺醒、運(yùn)動(dòng)活動(dòng)水平、應(yīng)激和***等因素。
1.1.5.6考慮動(dòng)物種屬差異。

1.2避暗法
1.2.1原理
利用小鼠嗜暗的習(xí)性設(shè)計(jì)一個(gè)裝置,一半是暗室,一半是明室,中間有一小洞相連。暗室底部鋪有通電的銅柵,并與一計(jì)時(shí)器相連,計(jì)時(shí)器可自動(dòng)記錄潛伏期的時(shí)間。小鼠進(jìn)入暗室即受到電擊,計(jì)時(shí)自動(dòng)停止。
1.2.2儀器和試劑
避暗儀:該裝置分明暗兩室。明室大小為12cm×4.5cm,其上方約20cm處懸一40w鎢燈絲。暗室較大,大小17cm×4.5cm,兩室之間有一直徑約3cm的圓洞。兩室底部均鋪以銅柵。暗室底部中間位置的銅柵可以通電,電擊強(qiáng)度可在一旋鈕上任意選擇。一般40v電壓。暗室與一計(jì)時(shí)器相連,計(jì)時(shí)器可自動(dòng)記錄潛伏期的時(shí)間。
試劑:樟柳堿、環(huán)已酰亞胺、乙醇。
1.2.3實(shí)驗(yàn)方法
1.2.3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 同1.1.3.1
1.2.3.2劑量設(shè)計(jì)和分組 同1.1.3.2
1.2.3.3實(shí)驗(yàn)方法及步驟
1.2.3.3.1受試樣品對(duì)正常小鼠記憶的影響
末次給樣后次日(或一次給樣后1h)開始訓(xùn)練。實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠面部背向洞口放入明室,同時(shí)啟動(dòng)計(jì)時(shí)器。動(dòng)物穿過洞口進(jìn)入暗室受到電擊,計(jì)時(shí)器自動(dòng)停止,取出小鼠,記錄每鼠從放入明室至進(jìn)入暗室遭電擊所需的時(shí)間,此即潛伏期,訓(xùn)練5min,并記錄5min內(nèi)的電擊次數(shù)(記憶獲得)。24h或48h后重作測驗(yàn),記錄每只動(dòng)物進(jìn)入暗室的潛伏期和5min內(nèi)的電擊次數(shù),并計(jì)算5min內(nèi)進(jìn)入暗室(錯(cuò)誤反應(yīng))的動(dòng)物百分率(記憶鞏固)。停止訓(xùn)練5天后可以在不同的時(shí)間進(jìn)行一次或多次記憶消退實(shí)驗(yàn)(記憶再現(xiàn))。
1.2.3.3.2受試樣品對(duì)記憶障礙模型小鼠的影響:
1.2.3.3.2.1模型制造:方法同1.1.3.3.2.1
1.2.3.3.2.2操作方法:同1.2.3.3.1
1.2.4數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定
潛伏期時(shí)間為計(jì)量資料,可用方差分析,但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),方差齊,計(jì)算F值,F(xiàn)值 5min內(nèi)進(jìn)入暗室的次數(shù)和5min內(nèi)進(jìn)入暗室的動(dòng)物數(shù)均為計(jì)數(shù)資料,可用X2檢驗(yàn),四格表總例數(shù)小于40,或總例數(shù)等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí),應(yīng)改用確切概率法。
若受試樣品組小鼠進(jìn)入暗室的潛伏期明顯長于對(duì)照組,5min內(nèi)進(jìn)入暗室的錯(cuò)誤次數(shù)或5min內(nèi)進(jìn)入暗室的動(dòng)物數(shù)少于對(duì)照組,且差異有顯著性,以上三項(xiàng)指標(biāo)中任一階段(記憶獲得、記憶鞏固和記憶再現(xiàn))的任一項(xiàng)指標(biāo)陽性,均可判定該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性。
1.2.5注意事項(xiàng):同1.1.5

1.3穿梭箱實(shí)驗(yàn)(雙向回避實(shí)驗(yàn))
1.3.1原理:條件反射
1.3.2儀器與試劑
儀器:大鼠穿梭箱。該裝置由實(shí)驗(yàn)箱和自動(dòng)記錄打印裝置組成。實(shí)驗(yàn)箱大小為50cm×16cm×18cm。箱底部格柵為可以通電的不銹鋼棒,箱底中央部有一高1.2cm擋板,將箱底部分隔成左右兩則。實(shí)驗(yàn)箱頂部有淘汰和蜂鳴音控制器,自動(dòng)記錄打印裝置可連續(xù)自動(dòng)記錄動(dòng)物對(duì)電刺激(燈光或/和蜂鳴器)的反應(yīng)和潛伏期,并將結(jié)果打印出來。
試劑:樟柳堿,環(huán)已酰亞胺,乙醇
1.3.3實(shí)驗(yàn)方法
1.3.3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Wistar或SD大鼠,斷乳鼠或成年鼠,雄、雌均可。
1.3.3.2劑量設(shè)計(jì)和分組 同1.1.3.2
1.3.3.3實(shí)驗(yàn)方法及步驟
1.3.3.3.1受試樣品對(duì)正常大鼠條件反射建立的影響
將大鼠放入箱內(nèi)任何一側(cè),20s后開始呈現(xiàn)燈光或蜂鳴音,持續(xù)20s,后10s內(nèi)同時(shí)給以電刺激(100v,0.2mA,50Hz,AC)。大鼠在遭電擊后即逃避,必須跑到對(duì)側(cè)頂端,擋住光電管后才可中斷電擊,此為被動(dòng)回避反應(yīng),在每次電擊前給予條件刺激,反復(fù)強(qiáng)化后,大鼠在接受條件刺激后即跳向?qū)?cè)并擋住光電管而逃避電擊,此為主動(dòng)回避反應(yīng),每隔**訓(xùn)練一回,每回50次,連續(xù)訓(xùn)練4-5回后,動(dòng)物的主動(dòng)回避反應(yīng)率可達(dá)80-90%以上。根據(jù)打印結(jié)果分析如下指標(biāo):動(dòng)物反應(yīng)次數(shù),動(dòng)物主動(dòng)回避時(shí)間,動(dòng)物被動(dòng)回避時(shí)間,動(dòng)物主動(dòng)回避率。停止訓(xùn)練5-50天內(nèi),分2-3次測定其記憶消退情況。
1.3.3.3.2受試樣品對(duì)記憶障礙模型大鼠條件反射建立的影響
1.3.3.3.2.1模型制造:同1.1.3.3.2.1
1.3.3.3.2.2操作方法:同1.3.3.3.1
1.3.4數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定
動(dòng)物主動(dòng)回避時(shí)間和被動(dòng)回避時(shí)間為計(jì)量資料,可用方差分析,但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),方差齊,計(jì)算F值,F(xiàn)值 若實(shí)驗(yàn)組主動(dòng)和/或被動(dòng)回避時(shí)間明顯短于對(duì)照組,差異有顯著性,可判定為該指標(biāo)陽性。
1.3.5注意事項(xiàng):同1.1.5。

1.4水迷宮實(shí)驗(yàn)
1.4.1原理
動(dòng)物都有一種“探索”和“更替”傾向,當(dāng)離開一個(gè)臂時(shí),總是跑向“久”未跑過的“新”臂。小鼠不愿在水中,因而尋找能爬出水面的階梯,訓(xùn)練后,小鼠能記住找到階梯的路線。
1.4.2儀器與試劑
水迷宮自動(dòng)記錄儀。該儀器是由迷宮游泳箱和自動(dòng)記錄儀兩部分組成。迷宮游泳箱由聚乙烯塑料制成,長100cm、寬100cm、高30cm;內(nèi)徑長90cm、寬90cm、高30cm,永道寬12cm,泳道走向固定。見附圖。
1.4.3實(shí)驗(yàn)方法
1.4.3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 推薦使用純系小鼠,斷乳鼠或成年鼠,雌雄均可。
1.4.3.2劑量設(shè)置、給樣途徑和期限 均同1.1.3.2
1.4.3.3實(shí)驗(yàn)方法
1.4.3.3.1受試樣品對(duì)正常小鼠記憶的影響連續(xù)給樣30天,末次給樣次日開始訓(xùn)練。訓(xùn)練期間繼續(xù)給樣,每天一次。迷宮泳道水深9cm,水溫約20℃(≥15℃)。將小鼠訓(xùn)練時(shí)間限定為120s,在120s內(nèi)未到達(dá)終點(diǎn)的小鼠均記為120s。
**次訓(xùn)練前將小鼠放在梯子附近,使其自動(dòng)爬上3次。以后每次訓(xùn)練前將小鼠放在梯子附近,背朝樓梯,使其自動(dòng)爬上1次。實(shí)驗(yàn)分階段進(jìn)行,視動(dòng)物學(xué)習(xí)成績逐步加長路程。**次訓(xùn)練時(shí)用一擋板在A處擋死,從A處開始訓(xùn)練,記錄從A點(diǎn)到達(dá)終點(diǎn)的時(shí)間。**次訓(xùn)練加長路程,從B處開始,此路程約訓(xùn)練3次,至動(dòng)物數(shù)80%以上在2min內(nèi)達(dá)到終點(diǎn)后再延長路程,分別記錄各鼠每次從B點(diǎn)到達(dá)終點(diǎn)所需的時(shí)間和發(fā)生錯(cuò)誤的次數(shù)(進(jìn)入任何一個(gè)盲端一次均算一次錯(cuò)誤)。末次測試從起點(diǎn)進(jìn)行,將小鼠放在起點(diǎn),記錄從起點(diǎn)到達(dá)終點(diǎn)所需的時(shí)間和發(fā)生錯(cuò)誤的次數(shù)。每次訓(xùn)練時(shí),對(duì)2min內(nèi)未到達(dá)終點(diǎn)的小鼠,應(yīng)引導(dǎo)其到達(dá)終點(diǎn),從終點(diǎn)的樓梯上來,達(dá)到訓(xùn)練的目的。每次訓(xùn)練或測驗(yàn)時(shí)均將頭朝超始點(diǎn)。*后計(jì)算各組動(dòng)物5次訓(xùn)練和測試的總錯(cuò)誤次數(shù),到達(dá)終點(diǎn)的總時(shí)間及2min內(nèi)到達(dá)終點(diǎn)的總動(dòng)物數(shù)(百分率),(包括了記憶獲得和記憶鞏固兩個(gè)階段的成績)。停止訓(xùn)練5天后可在不同的時(shí)間從起點(diǎn)進(jìn)行消退實(shí)驗(yàn)(記憶再現(xiàn))。
1.4.3.3.2受試樣品對(duì)記憶障礙模型小鼠的影響
1.4.3.3.2.1模型制造方法:同1.1.3.3.2.1
1.4.3.3.2.2操作方法:同1.4.3.3.1
1.4.4數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定
到達(dá)終點(diǎn)的時(shí)間屬計(jì)量資料,可采方差分析,但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),方差齊,計(jì)算F值,F(xiàn)值 錯(cuò)誤次數(shù)和到達(dá)終點(diǎn)的動(dòng)物數(shù)(百分率)兩指標(biāo)為計(jì)數(shù)資料,可用X2檢驗(yàn),四格表總例數(shù)小于40,或總例數(shù)等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí),應(yīng)改用確切概率法。
試驗(yàn)組與對(duì)照組比,試驗(yàn)組到達(dá)終點(diǎn)所用的時(shí)間或到達(dá)終點(diǎn)前的錯(cuò)誤次數(shù)明顯少于對(duì)照組,或2min內(nèi)到達(dá)終點(diǎn)的動(dòng)物數(shù)明顯多于對(duì)照組,且經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)差異有顯著性。其中記憶獲得、記憶鞏固和記憶再現(xiàn)任意階段的任一項(xiàng)指標(biāo)為陽性,可判為該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)陽性。
1.4.5注意事項(xiàng)
1.4.5.1訓(xùn)練時(shí)在目標(biāo)區(qū)(終點(diǎn))停留的時(shí)間不能太短,否則推動(dòng)強(qiáng)化效果。
1.4.5.2每天訓(xùn)練結(jié)束后,要對(duì)實(shí)驗(yàn)箱進(jìn)行清洗,以**動(dòng)物留下的氣味。
1.4.5.3實(shí)驗(yàn)前可對(duì)動(dòng)物進(jìn)行初篩,經(jīng)訓(xùn)練后,2min內(nèi)仍不能游至終點(diǎn)者淘汰。
1.4.5.4其余同1.1.5。
記憶測試指標(biāo)一覽表

 

測試項(xiàng)目

評(píng)價(jià)指標(biāo)

所用儀器


動(dòng)

跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)

被動(dòng)回避時(shí)間、錯(cuò)誤次數(shù)和動(dòng)物出現(xiàn)錯(cuò)誤反應(yīng)百分率

跳臺(tái)儀

避暗實(shí)驗(yàn)

同上

避暗儀


動(dòng)

單向回避實(shí)驗(yàn)

達(dá)標(biāo)所需的訓(xùn)練次數(shù)

穿梭箱

雙向回避實(shí)驗(yàn)

回避時(shí)間和回避率

穿梭箱



水迷宮實(shí)驗(yàn)

到達(dá)**臺(tái)的時(shí)間和達(dá)標(biāo)所需的訓(xùn)練次數(shù)、動(dòng)物出現(xiàn)錯(cuò)誤反應(yīng)的動(dòng)物百分率

水迷檢驗(yàn)


1.5結(jié)果判定
跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、避暗實(shí)驗(yàn)、穿梭箱實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)四項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中任二項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。且重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致(所重復(fù)的同一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)兩次結(jié)果均為陽性),可以判定為該受試樣品改善記憶作用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)陽性。

2人體試食試驗(yàn)
2.1改善記憶的保健食品人體試食試驗(yàn)的一般原則
2.1.1受試樣品進(jìn)行人體試食試驗(yàn),受試樣品必須有其來源、組成、加工工藝和衛(wèi)生條件的詳細(xì)說明,必須先經(jīng)毒理學(xué)**性評(píng)價(jià),證明**無毒,也不存在任何潛在的危險(xiǎn)因素;經(jīng)動(dòng)物功效實(shí)驗(yàn)已證明有效,或者雖然動(dòng)物實(shí)驗(yàn)無效,但有大量背景資料證明確有改善人體記憶作用,在此基礎(chǔ)上,才能進(jìn)行人體試食試驗(yàn)。
2.1.2受試者:參加人體試食試驗(yàn)的受試者應(yīng)本著自覺自愿的原則。
2.1.3主試者:本試驗(yàn)的主試人員應(yīng)以保障受試者的健康為前提,對(duì)受試者高度負(fù)責(zé)。主試者應(yīng)與受試者一起服用受試樣品。主試人員必須經(jīng)過專門的培訓(xùn),取得結(jié)業(yè)證書后方可進(jìn)行該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。

2.2選擇受試者的原則
2.2.1從比較集中、各方面影響因素大致相同的群體中挑選受試者,比如學(xué)校、**或其它群體。參加人體試食試驗(yàn)的受試者應(yīng)本著自覺自愿的原則。
2.2.2文化程度基本一致(均選有文化的人或均選無文化的人)
2.2.3屬同一年齡組,如不在同一年齡組,則應(yīng)對(duì)量表分進(jìn)行校正
2.2.4未接受過類似測試
2.2.5 6個(gè)月以內(nèi)未服用過與改善記憶有關(guān)的藥品或保健食品
2.3受試樣品的劑量和使用方法:按照生產(chǎn)廠家推薦的服用量和服用方法服用。
2.4試驗(yàn)設(shè)計(jì)和分組
2.4.1試驗(yàn)原則:對(duì)照、雙盲、隨機(jī)
2.4.2對(duì)照:記憶測試是一種心理測試,易受遷移學(xué)習(xí)和心理暗示的影響,**次測驗(yàn)的記憶商一般比**次高,有時(shí)對(duì)照組前后兩后測試的記憶商差異有顯著性。因此,不能僅以服樣前后自身比較的結(jié)果下結(jié)論,必須設(shè)置平行對(duì)照。
2.4.3雙盲:對(duì)照組必須服用安慰劑(不含有效成份,但其劑型、色澤、外觀、口感、包裝等均受試樣品相同),以消除心理暗示的影響;主試者在施測時(shí)不知道誰服樣品,誰服安慰劑,以消除主試者主觀偏向的影響,保證測試結(jié)果客觀可靠。
2.4.4同一受試者前后兩次測試由同一主試者進(jìn)行,
2.4.5施測順序一般是先聽覺測驗(yàn)后視覺測驗(yàn)。具體測驗(yàn)順序是:(1)指向記憶,(2)聯(lián)想學(xué)習(xí),(3)無意義圖形再認(rèn)。(4)圖象自由回憶。(5)人像特點(diǎn)聯(lián)系回憶。
2.4.6分組方法:服樣前對(duì)受試者進(jìn)行**次記憶商測試后,然后按記憶商隨機(jī)分為試食組和對(duì)照組,盡可能考慮影響結(jié)果的主要因素如文化水平、年齡等,進(jìn)行均衡性檢驗(yàn),以保證組間可比性。每組受試者不少于50例。
2.4.7受試樣品的劑量和使用方法:試食組按樣品推薦劑量和方法服用受試樣品,對(duì)照組服用安慰劑。觀察時(shí)間不少于30天,必要時(shí)可以延長。

2.5觀察指標(biāo)
各項(xiàng)指標(biāo)于試驗(yàn)開始及結(jié)束時(shí)各檢測一次。
2.5.1**性指標(biāo)
2.5.1.1一般狀況 包括精神、睡眠、飲食、大小便、心率等(兒童只要求進(jìn)行心肺聽診、肝脾觸診等一般體格檢查)
2.5.1.2血、尿常規(guī)檢查
2.5.1.3肝、腎功能檢查(**受試者測定此項(xiàng))
2.5.1.4胸透、心電圖、腹部B超檢查(**受試者測定此項(xiàng)且僅試驗(yàn)前檢查一次)
2.5.2功效指標(biāo):使用臨床記憶量表。用測試后的各分測驗(yàn)原始分查量表分,各分測驗(yàn)量表分相加得總量表分,用總表分查記憶商。
2.5.2.1指向記憶量表分
2.5.2.2聯(lián)想學(xué)習(xí)量表分
2.5.2.3圖象自由回憶量表分
2.5.2.4無意義圖形再認(rèn)量表分
2.5.2.5人像特點(diǎn)聯(lián)系回憶量表分
2.5.2.6記憶商

2.6試驗(yàn)材料
2.6.1錄有指向記憶和聯(lián)想學(xué)習(xí)的指導(dǎo)語和刺激詞的磁帶。
2.6.2圖片材料(分甲、乙兩套)
2.6.2.1無意義圖形再認(rèn) 備**次呈現(xiàn)用目標(biāo)刺激圖片20張,備**次再認(rèn)時(shí)呈現(xiàn)用目標(biāo)刺激和混入刺激圖片各20張,共40張,合計(jì)60張圖片。
2.6.2.2圖象自由回憶物象圖片 兩組各15張,共30張。
2.6.2.3人像特點(diǎn)聯(lián)系回憶 備**次呈現(xiàn)用的黑白勾畫人面像6張,備回憶時(shí)呈現(xiàn)的人面像6張,兩者內(nèi)容相同,順序不同,共計(jì)12張,每張人像圖片背面標(biāo)有該人像的姓氏、職業(yè)、愛好、特點(diǎn)。
2.6.3錄音機(jī)、秒表、記錄紙。

2.7測試內(nèi)容及方法:統(tǒng)一使用臨床記憶量表,具體方法參見臨床記憶量表。
臨床記憶量表有五項(xiàng)測試內(nèi)容:
指向記憶
聯(lián)想學(xué)習(xí)
圖象自由回憶
無意義圖形再認(rèn)
人像特點(diǎn)聯(lián)系回憶
臨床記憶量表的特點(diǎn)是備有有文化和無文化兩個(gè)部分的正常值,便于檢測無文化者。臨床記憶量表共包括5個(gè)分量表。各分測驗(yàn)的測試順序(如圖象自由回憶的圖片呈現(xiàn)順序)在所有受試者中應(yīng)一致。

2.7.1指向記憶:包括兩組內(nèi)容,每組24個(gè)詞,每詞由2-3個(gè)字組成,以1秒的速度讀出,兩個(gè)詞之間間隔2s,其中有12個(gè)詞屬于同一類別,即為指向詞:另12個(gè)混在其中相類似的詞,為非指向詞。(例如甲套**組詞中有12個(gè)詞屬于水果類,混雜的詞有粽子、年糕、冰糖12個(gè)食品類詞:**組詞中有12個(gè)詞屬于動(dòng)物類,混雜的詞有皮膚、尾巴、眼睛、耳朵等身體器官類詞12個(gè)。)要求受試者記憶指定的同類別詞(如水果)。24個(gè)詞隨機(jī)排列,用錄音機(jī)放送,每組詞全部放送完畢后,要求受試者者立即回憶,說出要求記憶的一類詞(不一定要按放送的順序回憶)。主試者按受試者者回憶的順序,將所說出的內(nèi)容在記錄紙上按順序用數(shù)字記在相應(yīng)詞下面的方格內(nèi),并記錄總的反應(yīng)時(shí)間,如果受試者說出的不是放送的詞內(nèi)容(稱為“添加性錯(cuò)誤”),則寫在記錄紙上該組詞后面空格內(nèi)。如果說的是混雜進(jìn)去的不需記憶的詞,則記在下面非指向欄內(nèi)相應(yīng)詞下,亦算錯(cuò)誤。反應(yīng)時(shí)間從主試者說:“現(xiàn)在請(qǐng)您回答”算起,直到回憶結(jié)束。允許回憶時(shí)間不超過2min。
當(dāng)**組詞受試者回憶結(jié)束后,間隔5s,再重復(fù)一遍指導(dǎo)語,然后放送**組詞,方法同前。在**組詞回憶完畢后,詢問受試者“除了要求您記的動(dòng)物(或穿戴)這類詞以外,您還記得別的詞嗎?”這就是“非指向記憶”結(jié)果,可記錄在表內(nèi)混雜詞下面的方格內(nèi)。這里要注意在**組詞回憶完畢時(shí),不要做這樣的詢問,否則將引起受試者在識(shí)記**組詞時(shí)把注意力指向識(shí)記包括指向和非指向在內(nèi)的所有詞,那就不符合這項(xiàng)測驗(yàn)的原意了。*后詢問受試者“用什么方法記憶”。
指導(dǎo)語:“我念一些詞,您要注意聽,里面有的是水果名字(或動(dòng)物名字、蔬菜名字、穿戴的東西),有的不是,要求您記住水果名字(或動(dòng)物名字—天上飛的、地下跑的、爬的,大的、小的都算;蔬菜名字、穿戴的東西)。我念完以后,您要把聽過的水果(或動(dòng)物、蔬菜、穿戴)的名字說出來,不一定按照我念的順序說,記得什么就先說什么,聽明白了嗎?現(xiàn)在注意聽”。如果指導(dǎo)語沒聽明白,可以重復(fù)口述一遍??陬^重復(fù)時(shí),指導(dǎo)語不得任意更改,例如,“要求記住水果(或其它)名字”不得改成“只要記住水果名字或光記(或就記)水果名字”,或者甚至加上“不記其它的東西”就更不對(duì)了,這會(huì)導(dǎo)致沒的結(jié)果,是不允許的。計(jì)分:以兩組指向記憶刺激詞的正確回憶數(shù)之和來計(jì)分,并記錄添加性錯(cuò)誤的詞或其它錯(cuò)誤備分析研究用。(滿分24分)。
甲套指向記憶詞呈現(xiàn)順序?yàn)椋?/span>
1.橘子 香蕉 粽子 石榴 桃子 粉條 年糕 西瓜 葡萄 冰糖 鴨蛋 柿子 茶葉 豆腐 蘋果 白酒 牛奶 李子 餅干 杏 花椒 香瓜 木耳 鴨梨
2.烏鴉 公雞 耳朵 蜜蜂 兔子 指甲 皮膚 狐貍 麻雀 眼睛 肩膀 青蛙 牙齒 肝臟 蒼蠅 翅膀 心臟 老虎 頭發(fā) 猴子 尾巴 蜻蜓 鼻子 螞蟻
乙套指向記憶詞呈現(xiàn)順序?yàn)椋?/span>
1.蘿卜 茄子 大麥 韭菜 黃瓜 玉米 松樹 扁豆 冬瓜 梅花 稻子 辣椒 荷花 楊樹 白菜 桃花 棉花 菠菜 芝麻 西紅柿 菊花 芹菜 柳樹 豆芽菜
2.圍巾 球鞋 牙膏 裙子 手套 筷子 板凳 短褲 雨衣 鐵鍋 剪刀 大衣 鬧鐘 電燈 襪子 火柴 縫紉機(jī) 皮襖 刷子 襯衫 扁擔(dān) 毛褲 掃帚 草帽

2.7.2聯(lián)想學(xué)習(xí):每套有12對(duì)2個(gè)字組成的詞構(gòu)成量表,其中容易的(成對(duì)聯(lián)想詞間有邏輯聯(lián)系)與困難的(成對(duì)聯(lián)想詞間無邏輯聯(lián)系)成對(duì)詞各6對(duì),容易聯(lián)想包括反義詞(如困難—容易)、同類詞(如太陽—月亮)和從屬詞(如牲口—牛馬)各兩對(duì);困難聯(lián)想包括具體—具體(西瓜—衣服)、抽象—具體(如勇敢—電燈)和抽象—抽象(如光明—服從)成對(duì)詞各兩對(duì)。用以檢查對(duì)不同成對(duì)詞的記憶情況。以每對(duì)詞3s的速度讀出,兩對(duì)詞之間間隔2s,12對(duì)詞隨機(jī)排列,用錄音機(jī)放送,共放送三遍,即受試者有三次學(xué)習(xí)機(jī)會(huì),但每遍詞放送的順序不同。每放送一遍后,主試者念每對(duì)詞的前面一個(gè)詞(即刺激詞),要求受試者答出后面一個(gè)詞來(即反應(yīng)詞),主試者將結(jié)果記錄在相應(yīng)格內(nèi)。如果回答正確,打“√”號(hào),如果錯(cuò)誤,則記錄錯(cuò)答之詞,沒答出來,則以“0”表示。每對(duì)詞允許回憶時(shí)間5s。*后詢問受試者“用什么方法記憶”。
指導(dǎo)語:“我給您念12對(duì)詞,您要注意聽,要求您記住哪兩個(gè)詞是連在一起的一對(duì),比如我念‘桌子—車馬’,表示‘桌子’和‘馬車’是聯(lián)在一起的一對(duì)詞。我念完12對(duì)詞以后,就念每對(duì)詞中的前面一個(gè)詞,要求您答出和它一對(duì)的后面一個(gè)詞來,比如我念‘桌子’,您就回答(停頓一下,讓受試者回憶)‘馬車’聽明白了嗎?”如果沒聽明白,可以重復(fù)口述一遍。
計(jì)分:分為容易、困難以及兩者之和三種分?jǐn)?shù)。每遍放送后,對(duì)容易的詞每答對(duì)一個(gè)計(jì)0.5分,6對(duì)共3分;困難的詞每答對(duì)一個(gè)計(jì)1分,6對(duì)共6分,6對(duì)容易和6對(duì)困難詞之和為9分,三遍的滿分為27分。

2.7.3圖象自由回憶:包括2組畫有物體的圖片材料,每組15張,所畫的物體都是人們常見的、熟悉的和易于辨認(rèn)的東西,如日用品、交通工具等。每張圖片呈現(xiàn)4s、圖片間間隔2s,圖片順序隨機(jī)排列。15張圖片呈現(xiàn)完畢后,要求受試者立即回憶說出所記得的圖片內(nèi)容(不一定要按刺激呈現(xiàn)的順序回憶)。主試者按受試者回憶的順序,將所記得的圖片在記錄紙上按順序用數(shù)字記在相應(yīng)圖片名稱下的方格內(nèi),并記錄總的反應(yīng)時(shí)間。如果受試者說出的是圖片中沒有的內(nèi)容(稱為添加性錯(cuò)誤),則寫在記錄紙上該圖片系列后面的空格內(nèi)。反應(yīng)時(shí)從主試者“現(xiàn)在請(qǐng)您回答”算起,直到回憶結(jié)束。允許回憶時(shí)間不超過2min。當(dāng)**組圖片受試者回憶結(jié)束后,間隔5s,再重復(fù)一遍指導(dǎo)語,然后呈現(xiàn)**組圖片,方法同前。*后詢問受試者“用什么方法記憶”。
口述指導(dǎo)語:“我給您看一些圖片,您仔細(xì)看,并記住它們是什么,有看不表的可以問,等全部看完后,立即說出您看到的是些什么東西,不一定按照我念的順序說,記得什么就先說什么,聽明白了嗎?現(xiàn)在注意看”如果沒聽明白,可以重復(fù)口述一遍,直到受試者理解為止。
計(jì)分 以兩組圖片的正確回憶數(shù)之和計(jì)分(滿分30分),并記錄添加性錯(cuò)誤。

2.7.4無意義圖形再認(rèn):包括20張目標(biāo)刺激圖片,40張?jiān)僬J(rèn)刺激圖片(其中與呈現(xiàn)圖片相同目標(biāo)刺激圖片20張,相似混同刺激圖片20張)。目標(biāo)刺激為5種形式的無意義圖形,即曲線封閉、直線封閉、曲線直線、曲線不封閉、直線不封閉。每種各4張,共20張。
測驗(yàn)時(shí),先給受試者分別呈現(xiàn)20張目標(biāo)刺激圖片,每張呈現(xiàn)3s,相隔3s,要求受試者記住這些目標(biāo)刺激。然后,隨機(jī)呈現(xiàn)40張?jiān)僬J(rèn)刺激圖片(包括目標(biāo)刺激圖片和混同刺激圖片),圖片隨機(jī)排列,要求受試者將與目標(biāo)刺激圖片完全相同的圖片辨認(rèn)出來,即每張圖片呈現(xiàn)時(shí),回答“看過”或“沒看過”,每張?jiān)试S回憶時(shí)間為5s。如果對(duì)目標(biāo)刺激回答“看過”,則按圖片中央Z號(hào)(從1--20)在記錄紙目標(biāo)刺激一項(xiàng)相應(yīng)格內(nèi)打“√”號(hào),如答“沒看過”,則打“×”號(hào)。如果對(duì)混入刺激回答“沒看過”,則按圖片中央Z號(hào)(從21--40)在記錄紙混入刺激一項(xiàng)相應(yīng)格內(nèi)打“√”號(hào),如答“沒看過”,則打“×”號(hào)。*后詢問受試者“用什么方法記憶”。
口述指導(dǎo)語:“我給您看一些由簡單的曲線和直線構(gòu)成的圖形,看的時(shí)間比較短,您要仔細(xì)看,并記住它們的特點(diǎn),有看不表的可以問,等看完后,我再給您看另一些圖片,其中有您看過的,也有您沒有看過的,它們都很相似,要求您認(rèn)出哪些是看過的,哪些是沒看過的,聽明白了嗎?現(xiàn)在注意看”。如果沒聽明白,可以重復(fù)口述一遍,直到受試者理解為止。
無意義圖形背面的數(shù)字表示
計(jì)分 再認(rèn)分=(正確再認(rèn)目標(biāo)刺激—錯(cuò)誤混入刺激數(shù))×2(滿分40分),即再認(rèn)分=(擊中—虛報(bào))×2
對(duì)目標(biāo)刺激回答“看過”,稱為“擊中”,對(duì)沒看過的混入刺激也回答“看過”,稱為“虛報(bào)”。

2.7.5人像特點(diǎn)聯(lián)系回憶:包括6張黑白人面像圖片。按隨機(jī)順序排列每張人像分別呈現(xiàn)9s,間隔3s,在呈現(xiàn)的同時(shí),告訴被測驗(yàn)者每張圖片上的人像的姓名、職業(yè)和愛好等特點(diǎn),重復(fù)2遍,并要求被測驗(yàn)者記住人像及特點(diǎn)之間的聯(lián)系。然后再以另一順序呈現(xiàn)這些圖片,讓被測驗(yàn)者立即說出人像的姓名、職業(yè)和愛好等特點(diǎn)。如果回答正確,主試者在記錄者即說出人像的姓名、職業(yè)和愛好等特點(diǎn)。如果回答正確,主試者在記錄紙相應(yīng)格內(nèi)打“√”號(hào),回答錯(cuò)誤,則記下說錯(cuò)的內(nèi)容,每張人像允許回憶時(shí)間30s。
口述指導(dǎo)語:“我給您看一些畫的人像,在給您看每張人像的同時(shí),向您介紹他姓什么、職業(yè)和愛好特點(diǎn),請(qǐng)您一邊注意看人像,一邊注意聽介紹,且要把人你和他的三個(gè)特點(diǎn)聯(lián)系起來記憶??赐耆咳讼窈?,當(dāng)我再給您看每一張人像時(shí),要求您立即說出他的三個(gè)特點(diǎn),不一定按我說的順序回答,記得什么先說什么,聽明白了嗎?”,如果沒聽明白,可以重復(fù)口述一遍,直到受試者理解為止。
計(jì)分 分別記錄回憶出的姓名、職業(yè)和愛好的數(shù)目,每個(gè)姓名記2分,每項(xiàng)職業(yè)和愛好各記1分,然后以三項(xiàng)總和計(jì)分。(滿分24分)
臨床記憶量表的5個(gè)分量表都有各自的記分方法,各分量表得出的分?jǐn)?shù)均為原始分。根據(jù)這些原始分,換算量表分的等價(jià)值表,查出各分量表的量表分,計(jì)算出總量表分:然后按照不同的年齡組的總量表分的等值記憶商數(shù)換算表,即可查得記憶商(MQ)。這就作為衡量人的記憶水平的指標(biāo)。

2.8數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定
此試驗(yàn)數(shù)據(jù)為計(jì)量資料,對(duì)兩組各分測驗(yàn)量表分和記憶商可用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析。自身對(duì)照可以采用配對(duì)t檢驗(yàn),組間平行比較采用兩樣本均數(shù)t檢驗(yàn),后者需進(jìn)行方差劑性檢驗(yàn),對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換,待滿足正態(tài)或方差齊后,用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn);若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差劑要求,改t’檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn);但變異系數(shù)太大(如CV>50%)的資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。
結(jié)果判定:在試驗(yàn)前兩組記憶商均衡的前提下,試食后試食組的記憶商高于對(duì)照組,且差異有顯著性,同時(shí)試食組試驗(yàn)后的記憶商高于其試驗(yàn)前的記憶商,且差異有顯著性,可以認(rèn)為受試樣品具有改善記憶作用。

2.9注意事項(xiàng)
2.9.2心理測驗(yàn)必須由受過訓(xùn)練的人員進(jìn)行,否則影響試驗(yàn)結(jié)果。
2.9.2測試應(yīng)當(dāng)在一個(gè)安靜的房間內(nèi)進(jìn)行。除受試者和主試者外,盡量避免有其它人在場。
2.9.3本量表內(nèi)有三項(xiàng)和視覺有關(guān)的分測驗(yàn),室內(nèi)光線必須保證能看得清楚刺激圖片。盡量排除因聽力或視力不佳而影響記憶成績。
2.9.4必須注意受試者受測時(shí)的精神狀態(tài),測驗(yàn)需在受試者情緒正常、不反對(duì)接受測試、注意力比較集中的情況下進(jìn)行。受試者是否疲倦,注意力是否集中,是否配合、對(duì)測試是否緊張,是否有信心等均需記錄在記錄紙的首頁上。
2.9.5同一受試者的測試要求一次做完。在用年齡量表分比較分測驗(yàn)成績時(shí),必須注意不同分測驗(yàn)是否在相同的精神狀態(tài)下進(jìn)行的。
2.9.6填寫記錄必須認(rèn)真,字跡清楚。填寫時(shí)注意以下幾點(diǎn):
2.9.6.1首頁必須逐項(xiàng)填寫,即受試者的姓名、性別和年齡,以及檢查日期和時(shí)間。
2.9.6.2填寫文化程度和職業(yè)作為了解除受試者接受測驗(yàn)的背景材料。
2.9.6.3填寫健康狀況或診斷,前一夜睡眠情況或當(dāng)時(shí)疲倦與否。
2.9.6.4對(duì)表明當(dāng)時(shí)精神狀的各項(xiàng),如配合程度、注意力、緊張狀態(tài)、信心等也要填寫清楚。
2.9.6.5除記錄受試者記憶回答的正誤外,應(yīng)當(dāng)記下錯(cuò)誤回答的具體內(nèi)容,以備分析研究用。
2.9.6.6是否應(yīng)用記憶方法以及使用什么方法對(duì)記憶研究是有益的。在用此量表進(jìn)行研究時(shí)應(yīng)當(dāng)記錄此項(xiàng)。
2.9.6.7各項(xiàng)分測驗(yàn)成績的原始分記入首頁總結(jié)表中,要先經(jīng)復(fù)查,復(fù)查無誤方可填入原始分項(xiàng)內(nèi)。

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